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qpcr結(jié)果和wb結(jié)果不一致？是什么原因呢？今天讓我們來探討一下~一、實(shí)驗(yàn)技術(shù)層面的原因(1)樣品制備與處理在qPCR中，如果總RNA樣品提取環(huán)節(jié)出現(xiàn)失誤，如取材到液氮速凍耗時(shí)過長(zhǎng)導(dǎo)致RNA降解，或在制樣時(shí)沒有保持低溫環(huán)境、沒有有效防范外源性RNA酶的污染，都可能影響RNA的質(zhì)量和qPCR結(jié)果的準(zhǔn)確性。在WB實(shí)驗(yàn)中，蛋白樣品制備環(huán)節(jié)同樣至關(guān)重要。如果取材到液氮速凍耗時(shí)過長(zhǎng)或制樣時(shí)沒有保持低溫環(huán)境，可能導(dǎo)致蛋白降解。此外，如果沒有加蛋白酶抑制劑，也可能導(dǎo)致蛋白降解。另外，如果蛋...

細(xì)胞培養(yǎng)基作為細(xì)胞生長(zhǎng)和維持的“營(yíng)養(yǎng)液”，其質(zhì)量直接影響到細(xì)胞的生存狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，了解和掌握細(xì)胞培養(yǎng)基的正確處理和儲(chǔ)存方法至關(guān)重要。本文將探討一個(gè)常見的問題：細(xì)胞培養(yǎng)基是否適合在紫外燈下照射？這一問題的答案不僅關(guān)系到細(xì)胞培養(yǎng)基的穩(wěn)定性，還可能影響到實(shí)驗(yàn)的成敗。一、紫外燈的作用與風(fēng)險(xiǎn)紫外燈的殺菌原理紫外線（UV）是一種電磁輻射，根據(jù)波長(zhǎng)的不同，可以分為UVA（320-400nm）、UVB（280-320nm）和UVC（100-280nm）。其中，UVC因其能夠破...

雙恒電位儀是一種電化學(xué)研究?jī)x器，其工作原理和應(yīng)用領(lǐng)域上文已有詳細(xì)描述，這里不再贅述。需要強(qiáng)調(diào)的是，雙恒電位儀并不直接與基質(zhì)膠相關(guān)聯(lián)，而是用于電化學(xué)研究、腐蝕監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域的電化學(xué)測(cè)量和控制。基質(zhì)膠354277(Corning貨號(hào))是一種高質(zhì)量的細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)膠，常用于支持細(xì)胞生長(zhǎng)和分化。它來源于富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS小鼠腫瘤提取物，并經(jīng)過特殊處理以形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì)。該基質(zhì)膠模擬了體內(nèi)細(xì)胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能，有利于體外細(xì)胞的培養(yǎng)和分化。主要成分：基質(zhì)膠3...

一、類器官是什么類器官（Organoids）是一種在體外三維（3D）環(huán)境中培養(yǎng)的細(xì)胞簇集合，這些細(xì)胞簇能自組織并分化成具有與體內(nèi)器官相似的結(jié)構(gòu)和功能的微型模型。類器官技術(shù)的發(fā)展可以追溯到20世紀(jì)初，并經(jīng)歷了多個(gè)重要的發(fā)展階段。早在1907年，H.V.Wilson對(duì)分離的海綿細(xì)胞進(jìn)行研究，觀察到它們能自我組織并再生一個(gè)完整的有機(jī)體，H.V.Wilson（HerbertVoseWilson）是一位美國(guó)海洋生物學(xué)家。在19世紀(jì)末至20世紀(jì)初，科學(xué)界對(duì)于細(xì)胞是如何組成復(fù)雜多細(xì)胞生物的...

封閉液的選擇主要基于抗體和目標(biāo)蛋白，日常內(nèi)參，還有一些本底豐度比較高的蛋白用脫脂牛奶封閉沒問題；磷酸化蛋白可采用BSA，如若豐度很低，或測(cè)上清分泌蛋白個(gè)人比較推薦使用成品快封，脫脂牛奶和BSA效果其實(shí)都不太穩(wěn)定。?封閉液主要有以下幾種：脫脂奶粉、牛血清白蛋白（BSA）、血清、明膠和聚乙烯吡咯烷酮（PVP）。一、5%脫脂牛奶封閉時(shí)間：室溫1-2h或者4度過夜。脫脂奶粉zui常用和便宜的封閉劑，通常使用濃度為2.5%-5%。其優(yōu)點(diǎn)是經(jīng)濟(jì)實(shí)惠且效果良好，但缺點(diǎn)是如果目標(biāo)蛋白被磷酸化...