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單端測(cè)序和雙端測(cè)序的主要區(qū)別在于測(cè)序方式、應(yīng)用場(chǎng)景和測(cè)序質(zhì)量上。?一、?單端測(cè)序和雙端測(cè)序的主要區(qū)別一：測(cè)序方式1.?單端測(cè)序（Single-Read）?：?jiǎn)味藴y(cè)序是從DNA片段的一端進(jìn)行測(cè)序，只讀取一個(gè)方向的序列信息。在測(cè)序過(guò)程中，DNA樣本被片段化處理成200-500bp的片段，引物序列連接到DNA片段的一端，然后進(jìn)行測(cè)序?。2.?雙端測(cè)序（Paired-End）?：雙端測(cè)序同時(shí)從DNA片段的兩端進(jìn)行測(cè)序，讀取兩個(gè)方向的序列信息。在構(gòu)建文庫(kù)時(shí)，兩端都加上測(cè)序引物結(jié)合位點(diǎn)，...

繼上文《一文了解tNGS》之后，今天我們講講它的“兄弟”——mNGS吧~一、?mNGS簡(jiǎn)介?mNGS（MetagenomicNextGenerationSequencing）?是一種無(wú)需培養(yǎng)即可快速鑒定感染病原體的新技術(shù)，即宏基因組學(xué)二代測(cè)序技術(shù)，正在改變病原微生物檢測(cè)的現(xiàn)狀。它通過(guò)無(wú)需培養(yǎng)樣本的方式，實(shí)現(xiàn)高通量、快速鑒定感染病原體，顯著提高了檢測(cè)的敏感性和特異性。其原理、優(yōu)點(diǎn)和應(yīng)用場(chǎng)景如下。二、?mNGS原理mNGS通過(guò)對(duì)臨床樣本的DNA或RNA進(jìn)行高通量測(cè)序，無(wú)差別、無(wú)選...

一、前言為了確保操作準(zhǔn)確，必須確保每個(gè)泵都充滿藥物溶液。泵體內(nèi)滯留的氣泡或未能將流量調(diào)節(jié)器插入泵中，可能會(huì)導(dǎo)致泵送速率波動(dòng)不可預(yù)測(cè)。填充泵時(shí)，請(qǐng)確保溶液處于室溫。建議在ALZET泵的填充和處理過(guò)程中以及在手術(shù)植入過(guò)程中使用無(wú)菌技術(shù)。填充過(guò)程中溶液或流量調(diào)節(jié)器的意外污染可能會(huì)導(dǎo)致可能破壞活性的微生物生長(zhǎng)、組織刺激和不穩(wěn)定的結(jié)果。如果您擔(dān)心溶液的無(wú)菌性，請(qǐng)通過(guò)0.22µM注射器端過(guò)濾器（例如Millex®-GV）填充泵。在填充和植入過(guò)程中，應(yīng)戴上手術(shù)手套處理A...

一、前言Top⑩感受態(tài)(E.coli)和DH5α感受態(tài)細(xì)胞是常用的大腸桿菌細(xì)胞系，用于基因克隆、高效表達(dá)和蛋白質(zhì)產(chǎn)量增加等研究。雖然它們都是常用的實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞系，但它們?cè)谝恍╆P(guān)鍵方面存在區(qū)別。二、Top⑩感受態(tài)和DH5α感受態(tài)細(xì)胞基因型和用途對(duì)比1.?DH5α?：基因型為supE44、hsdR17、recA1、endA1、gyrA19、thi-1、relA1、△lacU169(80lacZΔM15)。主要用于分子克隆和質(zhì)粒提取，具有藍(lán)白斑篩選功能?。2.?Top⑩：基因型為F-...

一、tNGS技術(shù)原理tNGS是一種基于超多重PCR擴(kuò)增（或靶向捕獲）與高通量測(cè)序兩種技術(shù)結(jié)合的新一代測(cè)序技術(shù)。它使用大量針對(duì)特定基因序列的引物/探針對(duì)待測(cè)樣品中抽提出的核酸進(jìn)行超多重PCR擴(kuò)增/探針捕獲，獲得大量目標(biāo)核酸片段，再對(duì)這些目標(biāo)核酸片段進(jìn)行高通量測(cè)序，然后對(duì)所得序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)待測(cè)樣本中的核酸進(jìn)行高靈敏以及高分辨率的識(shí)別。二、tNGS優(yōu)點(diǎn)1.針對(duì)性強(qiáng)：tNGS只針對(duì)特定基因序列進(jìn)行測(cè)序，因此可以大大減少測(cè)序數(shù)據(jù)量，提高檢測(cè)效率和準(zhǔn)確性。2.高靈敏度...