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你知道瓊脂糖凝膠電泳實驗的實驗方法是什么嗎？有什么注意事項呢？讓我們一起來看看吧！一、瓊脂糖凝膠電泳實驗方法1.擇適合樣品預(yù)期片段大小的瓊脂糖凝膠濃度百分比。將瓊脂糖粉末與用于運行凝膠的相同類型的緩沖液（TAE）結(jié)合起來，加熱使混合物融化，避免沸騰。2.選擇所需尺寸的凝膠澆注模具和梳子，為樣品和marker提供足夠數(shù)量的孔，以及容納每個待裝樣品數(shù)量的孔容量。3.膠凝固后，將凝膠放入電泳儀中，電泳液沒過凝膠，根據(jù)加入量的多少，決定混合多少ul的lodingbuffer，將樣液混...

DNA的提取可以簡單的分為裂解和純化兩大步驟，裂解是破壞樣品細(xì)胞結(jié)構(gòu)，從而使樣品中的DNA游離在裂解體系中的過程，純化則是使DNA與裂解體系中的其它成分，如蛋白質(zhì)、鹽及其它雜質(zhì)分離的過程。那么該如何選擇DNA提取方法呢？讓我們一起來看看吧！一、酚氯仿抽提法酚氯仿抽提是去除蛋白質(zhì)的有效手段，但如果蛋白質(zhì)含量超過了其飽和度，裂解體系中的蛋白質(zhì)就不會被一次性去除，需要進行多次反復(fù)抽提，而每次的抽提均會導(dǎo)致核酸的損失。酚氯仿抽提的優(yōu)勢是成本低廉，對實驗條件要求較低。二、高鹽沉淀法高鹽...

熒光原位雜交（FluorescenceinsituhybridizationFISH）是一門新興的分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)，是20世紀(jì)80年代末期在原有的放射性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非放射性原位雜交技術(shù)。那么你知道熒光原位雜交（FISH）的實驗步驟是什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、實驗材料準(zhǔn)備1.實驗用具及材料（1）人的MyoD1（MYF3)基因探、人外周血中期染色體細(xì)胞標(biāo)本；（2）指甲油、甲酰胺、氯化鈉、檸檬酸鈉、氫氧化鈉、吐溫20等；（3）恒溫水浴鍋、培養(yǎng)箱、染色缸...

蛋白表達實驗的時，有時候?qū)嶒灂X得參考實驗方法和克隆的蛋白基因序列wan全沒有問題，但蛋白電泳就是沒有結(jié)果。下面讓我們一起來看看蛋白表達的常見問題有哪些吧！1、載體構(gòu)建錯誤，很多克隆新人經(jīng)常弄錯讀碼框。比如Qiagen的pQE系列載體，其克隆位點常有一兩個堿基的區(qū)別；另外有些酶產(chǎn)生粘端有些酶產(chǎn)生平端，這些都容易導(dǎo)致讀碼框錯誤，從而表達不出來。2、宿主菌選擇不當(dāng)，不同的宿主菌其基因型是不一樣的。有些經(jīng)過特殊修飾的載體，或者特殊用途的載體，或者有特殊啟動子的載體，必須選擇合適的宿...

你知道PCR反應(yīng)體系主要包含那些嗎？讓我們一起來看看吧！一、模板（template)模板即擴增用的DNA，可以是任何來源DNA(如基因組DNA、質(zhì)粒DNA等)或RNA（如總RNA、mRNA、tRNA、rRNA、病毒RNA等），但必須符合兩個條件：一是純度必須較高，二是濃度不能太高以免抑制。模板是待擴增的目的基因或特異片段，如診斷病人是否攜帶有突變基因時，其模板就是提取的病人血液中的DNA或RNA片段。PCR對模板DNA的純度不要求很高，但應(yīng)盡量不含有對PCR反應(yīng)有抑制作用的雜...