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022-66387942簡(jiǎn)要描述:Polyplus PEI DNA轉(zhuǎn)染試劑,是一種線性聚乙烯亞胺衍生物,不含動(dòng)物源成分,可為貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞提供高效且可重復(fù)的基因遞送。
試劑:Polyplus PEI DNA轉(zhuǎn)染試劑
傳遞的分子:DNA
應(yīng)用:質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
高通量篩選 (HTS)
細(xì)胞類型:貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞
轉(zhuǎn)染次數(shù):1 ml jetPEI® 足以在 96 孔板中進(jìn)行多達(dá) 2000 次轉(zhuǎn)染。
儲(chǔ)存:將 jetPEI® 儲(chǔ)存在 5 °C ± 3°C。
提供:101-01N、101-10N、101-40N 和 101B-010N 提供用于復(fù)合物形成的 150 mM NaCl 溶液。
協(xié)議:
在前向?qū)嶒?yàn)方案中,細(xì)胞在轉(zhuǎn)染前一天分裂,然后將 jetPEI®/DNA 復(fù)合物添加到貼壁或懸浮細(xì)胞中。
轉(zhuǎn)染基因庫(kù)(例如 DNA 文庫(kù))時(shí),反向方案最合適(圖 1)。 在此方案中,jetPEI®/DNA 復(fù)合物在添加細(xì)胞之前制備或沉積在孔中。 復(fù)合物可穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá) 4 小時(shí)(圖 2)。
已開發(fā)批處理方案以制備均質(zhì)的轉(zhuǎn)染細(xì)胞池。 為此,細(xì)胞在胰DAN白酶消化后立即轉(zhuǎn)染,同時(shí)仍處于懸浮狀態(tài)。 該協(xié)議是藥物篩選應(yīng)用的SHOU選,并允許快速處理,比正向協(xié)議快一天。
Fig.2 Effect of complex formation incubation time on transfection efficiency with jetPEI®. HEK-293 cells were transfected in 96-well plates with pCMVLuc and jetPEI® following the reverse transfection protocol. Luciferase activity was measured after 24 h.