DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium,杜氏改良Eagle培養(yǎng)基)是一種廣泛用于細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,其成分經(jīng)過精心優(yōu)化,提供了多種支持細(xì)胞生長(zhǎng)和代謝所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。主要包括以下幾類:
1. 葡萄糖:DMEM中的葡萄糖濃度分為高糖(4500 mg/L)和低糖(1000 mg/L)兩種選項(xiàng)。葡萄糖是細(xì)胞能量代謝的核心來源,細(xì)胞通過糖酵解及三羧酸循環(huán)(TCA)產(chǎn)生能量。
2. 氨基酸:
(1)谷氨酰胺:作為蛋白質(zhì)和核苷酸合成的重要前體,谷氨酰胺還參與細(xì)胞代謝中的氮循環(huán)。
(2)必需氨基酸:如賴氨酸、亮氨酸、纈氨酸等,提供了合成蛋白質(zhì)所需的關(guān)鍵材料。
(3)非必需氨基酸:如丙氨酸、天冬氨酸等,促進(jìn)細(xì)胞代謝與生長(zhǎng)。
3. 維生素:
(1)維生素B族:包括煙酰胺、泛酸鈣、核黃素、硫胺素等,它們作為多種代謝反應(yīng)中的輔酶,助力細(xì)胞能量代謝及核酸合成。
(2)膽堿:參與磷脂的合成,確保細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)與功能穩(wěn)定。
4. 無機(jī)鹽:
(1)鈣離子(Ca²?):在細(xì)胞內(nèi)外信號(hào)傳遞及維持細(xì)胞結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性方面發(fā)揮重要作用。
(2)鈉離子(Na?)、鉀離子(K?):協(xié)助保持細(xì)胞電解質(zhì)平衡,調(diào)節(jié)跨膜電位與滲透壓。
(3)氯離子(Cl?):與鈉、鉀離子協(xié)同,調(diào)節(jié)滲透壓及電解質(zhì)平衡。
(4)鎂離子(Mg²?):作為多種酶的輔因子,參與細(xì)胞代謝活動(dòng)。
5. 緩沖系統(tǒng):
(1)碳酸氫鈉(NaHCO?):在CO?培養(yǎng)箱中與培養(yǎng)基中的二氧化碳反應(yīng),維持pH值在7.2-7.4之間,確保細(xì)胞在適宜的酸堿環(huán)境中順利生長(zhǎng)。
6. 其他成分:
(1)酚紅:作為一種pH指示劑,當(dāng)培養(yǎng)基酸化時(shí),其顏色會(huì)從紅色變?yōu)辄S色,為實(shí)驗(yàn)者提供直觀的pH變化參考。
DMEM培養(yǎng)基的這些成分共同作用,為細(xì)胞提供充足的養(yǎng)分、穩(wěn)定的pH環(huán)境以及所需的能量代謝條件,從而促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)、繁殖和正常代謝活動(dòng)。
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