polyplus轉(zhuǎn)染試劑 jetPRIME®產(chǎn)品說明書

該polyplus轉(zhuǎn)染試劑 jetPRIME®產(chǎn)品說明書以DNA轉(zhuǎn)染為例來進(jìn)行說明：

第0天：細(xì)胞接種

→根據(jù)下表在V mL細(xì)胞生長培養(yǎng)基中接種細(xì)胞（每個(gè)孔、盤子或燒瓶的數(shù)量）

*備注：對(duì)于特定的細(xì)胞類型或懸浮細(xì)胞，請(qǐng)參考完整的方案。

第1天：轉(zhuǎn)染

→在血清存在的情況下進(jìn)行轉(zhuǎn)染

→僅使用jetPRIME®緩沖液

→以60-80%融合率轉(zhuǎn)染細(xì)胞

第2-3天：測(cè)量基因表達(dá)

√ Protocol優(yōu)化：

測(cè)試不同的DNA量：X、0.5X和1.5X；

測(cè)試不同的DNA/jetPRIME®比例，1:2至1:3；

有關(guān)細(xì)胞特異性Protocol，請(qǐng)聯(lián)系益元利康客服獲取相關(guān)信息。

備注：對(duì)于HEK-293和HeLa細(xì)胞，可以將DNA量減少到0.5X，并使用1:2 DNA/jetPRIME®比例。

√ 提高敏感細(xì)胞細(xì)胞活力的提示：

轉(zhuǎn)染后4小時(shí)更換培養(yǎng)基；

將DNA量減少到0.5倍，同時(shí)保持之前使用的DNA/jetPRIME®比例；

在較早的時(shí)間點(diǎn)（例如轉(zhuǎn)染后24小時(shí)而不是48小時(shí)）分析轉(zhuǎn)染；

檢查靶基因是否影響細(xì)胞活力。

√ 良好的DNA轉(zhuǎn)染實(shí)例：

適當(dāng)儲(chǔ)存jetPRIME®（5±3°C）；

確保細(xì)胞在轉(zhuǎn)染前已傳代兩次以上且少于20次；

丟棄過度分化的細(xì)胞；

定期檢查支原體污染情況；

使用報(bào)告基因來建立和優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件；

血清質(zhì)量可能嚴(yán)重影響轉(zhuǎn)染效率，購買新一批血清時(shí)或胰蛋白酶檢查細(xì)胞活力以及轉(zhuǎn)染效率。

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